組培生產中常見的問題及解決方法

  褐化

  解決方案：在培養基中添加活性碳可以防止植物組織自身的酚類物質排泌和變褐老化，對形態發生和器官形成有良好作用。一般認為，活性碳主要吸附非極性物質及色素大分子，可以減少一些有害物質的影響，但是具體吸附的選擇性很差，溫度低時吸附力增強，溫度高時吸附力減弱，甚至會解吸附，通常使用濃度為0.5-10g/L。加入活性炭后使培養基變黑，對一些植物誘導生根有利。大量活性炭的加入會削弱瓊脂的凝固能力，因此要多加些瓊脂。很細的活性炭容易沉淀，因此通常在瓊脂將要凝固時，需輕輕搖動培養瓶。

  酚污染

  解決方案：植物外植體組織在接種時的切割面會溢泌一些酚類物質，在接觸空氣中的氧氣后，其會氧化為相應的醌類物質，產生可見的茶色、褐色或黑色，此即謂“酚污染”。在木本植物，尤其是熱帶木本植物及少量草本植物中，此現象較為嚴重。

  常用的防治措施如下：

  1、試用抗酚類氧化的藥劑(半胱氨酸及其鹽酸鹽、二硫蘇糖醇、谷胱甘肽、抗壞血酸等。該類藥劑一般需用濃度為50-200mg/L。用經過濾滅菌的藥液洗滌剛切割的外植體傷口表面，或加入固體培養基的表層，或將剛切割的外植體浸入其中一定時間)

  2、適當降低培養基溫度。

  3、接種后先進行一定時間的暗培養。

  4、及時轉接入新鮮培養基。

  5、選擇切取外植體部位等。