圖1 鐵皮石斛快繁
2.2 不同激素處理對鐵皮石斛的組培的影響
用不同濃度的激素(表2)對鐵皮石斛大量進行處理,終獲得了幾組誘導率很高的濃度配比。其中,誘導率高的是1.5 mg/L的6-BA和2.0 mg/L的NAA,其誘導率為96%,其次是0.5 mg/L的6-BA,0.5 mg/L的NAA和1.5 mg/L的2,4-D,其誘導率是大約83%。其他濃度誘導率都在50%以下。因為加入活性炭具有良好的抑菌效果,因此在組培過程中依舊保存著0.1%的活性炭。(愈傷組織見圖2)
表2 鐵皮石斛組培不同激素處理
圖2 鐵皮石斛愈傷組織
2.3 鐵皮石斛的煉苗
經預實驗發現一次性澆透水過后,3天之后基質干透,需再次澆水,為防止水分過多爛根,水分較少根部枯萎,澆水周期定為3天。每隔十天觀察記錄一次現象,大約3個月之后,對數據進行生物統計學統計,統計出組培苗的成活率和幼苗的生長速率,可得出適宜石斛煉苗的條件和對其影響大的外界因素,從而實現對鐵皮石斛進行的生產培育工作。通過對鐵皮石斛的溫度、培養基質、水源等影響因素進行分組處理(表3、4),經一年的觀察,以及對出芽時間和數量的記錄,得出了鐵皮石斛煉苗快恢復(以分化出第一芽的時間為依據)的培養條件為30℃,⑤號培養基質并用光照過的自來水澆灌,第一芽分化的時間只有10 d。但這種條件對于鐵皮石斛日后生長不利,極易會出現枯死、爛根等情況。后期有利于鐵皮石斛生長(以植株長勢及后出芽總數為依據)的培養條件是25℃,③號培養基質。水質方面,自來水與光照過的自來水效果差不多,但均優于去離子水。在此條件下幼苗全部存活并且長勢良好,澆水次數方便人工管理,適合大面積煉苗(圖3)。
表3 30℃時的實驗處理
表4 25℃時的實驗處理
圖3 鐵皮石斛煉苗情況
3 討論
鐵皮石斛屬于藥用價值極高的產品。在快速生長的過程中,會造成藥用成分質量的下降。下一步的研究方向應該是改良培養基的配方以及培養環境來降低或防止此現象。如果要實現大批量的生產,培養基的成本也是亟待解決的方面,優化培養基的配方,使其物美價廉。
另外在煉苗過程中,建議先使用135的條件進行培養,出芽后立即轉移到233的條件中。
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