組培室設計基本規則

組培工廠應選址在安靜、潔凈、可避開各種污染環境的地方，才能減少操作污染，降低生產成本，確保工作的順利進行。根據已確定的生產規模，設計組培生產車間時，要全面了解工作中需要哪些基本的設備條件，以便因地制宜利用現有房屋改建或新建組培工廠，盡量做到合理布局。通常按組培生產程序先后，順次安排成一條連續的生產線，主要包括培養器皿清洗;培養基的配置、分裝、包扎和高壓滅菌;無菌操作材料的表面滅菌和接種;進入培養室培養;試管苗的種植和前期管理等。較為理想的平面布置見文章后面的圖3-1，3-2。

  一、清洗室

  要求具有耐酸堿的水池和排水口。每天都有大量的植物材料碎片、瓊脂等東西堆積，因此排水口一定要安裝過濾網，做到每天清洗檢查，一是減少微生物滋生源，二是避免排水系統堵塞，帶來不必要的麻煩。

  配有不同形狀及大小的洗滌刷，如果有可能安裝洗瓶機器，更能提高工作效率。 配備數個塑料箱盛裝瓶子，將瓶放入箱內時，應倒立，這樣可使瓶子自然干燥。

  二、培養基配制及滅菌室

  手提式高壓滅菌鍋2～3個，用于一些小型物品或急需用品的高壓滅菌。

  組培工廠必須配備1至數臺大型滅菌鍋，直徑40～50cm的不銹鋼或鋁鍋2～3個，用于溶解瓊脂或調制培養基，加熱源好采用煤氣灶或用電。

  去離子水發生器1～2臺。

  干燥箱1臺，用于器皿或急需用具的干熱滅菌。

  大型工作臺1～2張，用于培養基分裝、包扎等。

  玻璃柜1個，用于放置藥品等。

  試劑瓶、具刻度移液管、皮下注射器、量筒、搪瓷量杯、容量瓶、各式塑料瓶或塑料桶等易損品數個，更重要的是配備大量充足的培養瓶。

  三、檢測及稱量室

  PCR儀：可用于真菌和細菌性病原菌的檢測和部分病毒病的檢測。

  酶標儀：通過血清免疫技術(ELISA)進行主要病毒病的檢測。

  雙目顯微鏡、解剖鏡：用于植物組織培養材料的形態發育及細胞觀察。

  凹穴載玻片：用于細胞懸浮培養。

  載玻片和蓋玻片：用于制作細胞和組織的顯微制片。

  光照培養箱;用于不同種類植物培養方法或培養條件的研究。

  冰箱：用于貯存化學藥品，培養基母液和植物材料等。

  低溫冰箱：用于長期貯存培養基儲備液，某些酶和椰子汁等。

  稱量儀器：包括感量為1/10000的電子天平，感量為1/10的普通托盤天平，稱量為1～5kg的臺秤等，用于藥品的稱量配制和植物組織生長量的測定。

  水質及培養基檢測儀器：包括pH酸度計、電導率儀或Ec值測定儀。

  細菌濾膜及其支座：用于對溶液進行過濾滅菌。

  四、無菌操作室(接種室)

  這是組培工廠的核心和關鍵部分，是進行無菌操作的場所，如植物材料的消毒接種，無菌材料的繼代，叢生苗的增殖或切割，嫩莖插植生根等。它也關系到污染率這項重要的成本指標的高低，直接影響組培工廠的工作效率及經濟效益。無菌操作室原則上宜小不宜大，要有緩沖間，以便進人無菌室前在此洗手、換衣、換鞋、預處理材料等。無菌室的地板和四周墻壁應盡可能光潔，不易積染灰塵，易于采取各種清潔和消毒措施。無菌室內要吊裝紫外滅菌燈，用于經常照射滅菌。要安裝空調機，保持室溫在23～25℃，原則上無菌室的門窗應緊閉，保持與外界相對隔絕。無菌操作室內需要的用具如下。

  超凈工作臺：用于進行無菌操作。

  室內小推車：用于運送培養物、培養基和各種器皿用具。

  酒精燈：用于灼燒各種金屬用具。

  手持噴霧器：用于在超凈工作臺內或對其他物品噴灑酒精進行消毒。

  帶蓋螺口玻璃瓶：用于盛裝無菌水，對植物材料進行表面消毒。

  大的鈍頭鑷子：用于進行接種和繼代、生根等操作。

  細解剖針;用于植物材料的解剖。

  解剖刀：用于切割植物材料。

  各種孔徑的不銹鋼篩網：用于分離太小不同的細胞團。

  低速臺式離心機：用于沉淀細胞，以便確定沉積細胞的總體積或清洗原生質體。

  振蕩培養器;用于植物材料的液體培養。

  血球計算器;用于細胞計數。